苗長林1,羅文1,呂鵬梅1*,李惠文1,楊玲梅1,袁振宏1,蔣劍春2
(1. 中國科學院 廣州能源研究所,中國科學院可再生能源與天然氣水合物重點實驗室,廣東 廣州 510640;2. 中國林業(yè)科學研究院 林產化學工業(yè)研究所,江蘇 南京 210042)
摘 要:采用微波-亞硝基胍誘變方法對粗酶活為 10 U/mL 的米黑根毛霉進行誘變處理以獲得高產酶能力的菌株,實驗獲得最佳誘變條件為:功率 500 W 微波處理時間為 100 s,亞硝基胍處理時間為 45 min。通過熒光圈初篩和搖瓶復篩,篩選出一株酶活可達 20.50 U/mL 突變菌株,該菌株比原始出發(fā)菌株脂肪酶活力提高了 105%,將MN4連續(xù)傳代5次,酶活穩(wěn)定。對MN4突變菌株的產酶條件進行研究,結果表明,MN4突變菌株最適產酶條件為:發(fā)酵溫度 30℃,起始pH值為7.0,發(fā)酵時間 4 d。在此條件下,該突變菌株所產脂肪酶活最高,達 22.90 U/mL,產酶活力相對原始出發(fā)菌株提高了 129.0%。試驗結果表明:微波、亞硝基胍對米黑根毛霉菌體細胞的致死作用表現出相似的趨勢,在一定范圍內都與誘變時間呈線性正相關。微波-亞硝基胍復合處理還呈現一定的協(xié)同效應,可以減弱單一誘變劑反復誘變產生的誘變抗性和飽和性,能夠實現優(yōu)勢互補,提高誘變效率。
關鍵詞:脂肪酶;微波;亞硝基胍;誘變;米黑根毛霉
中圖分類號:TQ35;Q55 文獻標識碼:A 文章編號:0253-2417(2013)05-0030-05